Avaliação imunohistoquímica dos vasos linfáticos em fígados humanos com hepatite crônica C - relação com variáveis histológicas / Immunohistochemical assessment of lymphatic vessels in human livers with chronic hepatitis c - relation to histological variables

ABSTRACT Background Viral hepatitis C is a significant public health challenge. The disease may remain clinically silent in both acute and chronic forms, and chronic infections may progress to advanced disease such as cirrhosis and hepatocellular carcinoma, requiring costly treatment, compromising the patient's quality of life and even leading to death. For this reason, it is one of the most frequent indications for liver transplantation. Although treatment with direct-acting antivirals represents remarkable progress, many patients are still infected and even those who cleared the viral infection must be followed due to their previous hepatic lesions, especially regarding the disturbances of lobular architecture and the sanguineal and lymphatic vessels. Objective To assess immunohistochemical aspects of lymphatic sprouts and mature lymphatic vascularity with histological variables of liver injury attributable to hepatitis C virus (HCV) and fatty disease. Methods The present study included 72 liver biopsies of cases with chronic hepatitis C. Morphologic changes reflecting "staging" and "activity" were analyzed. Immunohistochemical reactions were performed with monoclonal antibody D2-40 anti-podoplanin. Major histological variables were also semiquantified so as to enable the search for possible associations among histological and Immunohistochemical criteria, as well as with genotypes 1 and 3 of HCV. Results Histological findings showed that the different degrees of strutural changes were well represented in this casuistic. Intralobular/parenchymal necro-inflammatory activity was predominantly mild to moderate. Most cases did not show major evidences of fatty disease, which was found significantly higher in cases infected with HCV genotype 3. The amount of portal lymphatic sprouts increased along with the progression of structural changes, maximal at cirrhosis. Portal lymphatic sprouts as well as portal mature lymphatic vessels also showed an increase parallel to the increase in the degree of portal/septal inflammatory infiltrate. In the present study, no significant association was found between the proportion of portal lymphatic sprouts or portal mature lymphatic vessels and the degree of periportal/periseptal activity. No significant relations were detected between lymphatic sprouts/mature vessels and periportal or parenchymal inflammatory activity, nor with infections due to HCV genotype 1 or 3. Conclusion Visualization and semiquantitation of sprouts and mature lymphatic vessels were clearly yielded by Immunohistochemical staining with monoclonal antibody D2-40. The amount of lymphatics was increased along fibrogenic process, significantly related to progression of liver disease and maximal at cirrhosis. No significant relations were detected with necro-inflammatory activity at interface or in the parenchyma.

RESUMO Contexto A hepatite C é um relevante problema de saúde pública. A doença pode permanecer clinicamente silenciosa tanto na forma aguda como na crônica e as infecções crônicas podem progredir para doenças avançadas, tais como cirrose e carcinoma hepatocelular (CHC), requerendo tratamentos dispendiosos, comprometendo a qualidade de vida do paciente e até mesmo levando à morte. Por esta razão, é uma das indicações mais frequentes para o transplante hepático. Apesar da introdução do tratamento com antivirais de ação directa (AAD) representar um progresso notável, muitos pacientes não receberam o tratamento e continuam infectados, e mesmo aqueles que eliminaram a infecção viral devem ser seguidos devido às lesões hepáticas anteriores, especialmente no que diz respeito às alterações da arquitetura lobular e dos vasos sanguíneos e linfáticos. Objetivo Avaliar os aspectos imuno-histoquímicos dos brotos linfáticos e dos vasos linfáticos "maduros" com variáveis histológicas de lesão hepática atribuíveis ao vírus da hepatite C (VHC) e à doença gordurosa. Métodos O presente estudo incluiu 72 biópsias hepáticas em pacientes com hepatite C crônica. Foram analisadas alterações estruturais relativas a "estadiamento" e "atividade". Reações imuno-histoquímicas foram realizadas com anticorpo D2-40 anti-podoplanina. As principais variáveis histológicas também foram semiquantificadas, de modo a permitir a procura de possíveis associações entre os critérios histológicos e imunohistoquímicos, bem como com os genótipos 1 e 3 do VHC. Resultados Os achados histológicos mostraram que os diferentes graus de alterações estrutural estavam bem representados nesta casuística. A atividade necro-inflamatória lobular/parenquimatosa foi predominantemente leve à moderada. A maioria dos casos não apresentava grandes evidências de doença gordurosa, que foi encontrada significativamente mais elevada nos casos infectados com o genótipo 3 do VHC. A quantidade de brotos linfáticos portais aumentou com a progressão de alterações estruturais, sendo máxima na cirrose. Os brotos linfáticos portais, bem como os vasos linfáticos "maduros" portais também mostraram um aumento paralelo ao aumento do grau de infiltrado inflamatório portal/septal. No presente estudo, não foi encontrada qualquer associação significativa entre a proporção de brotos linfáticos portais ou vasos linfáticos maduros portais e o grau de atividade periportal/periseptal. Não foram detectadas relações significativas entre os brotos linfáticos/vasos maduros e a atividade inflamatória periportal ou atividade inflamatória parenquimatosa, nem com infecções devido ao genótipo 1 ou 3 do VHC. Conclusão A reação imunohistoquímica com anticorpo monoclonal D2-40 possibilitou a visualização e a semiquantitação de brotos e vasos linfáticos "maduros" nas amostras obtidas por biópsia hepática. A quantidade de linfáticos aumentou ao longo do processo fibrogênico, significativamente relacionada com a progressão da doença hepática e máxima na cirrose. Não foram detectadas relações significativas com a atividade necro-inflamatória periportal ou parenquimatosa.

Accuracy of transient elastography-FibroScan®, acoustic radiation force impulse (ARFI) imaging, the enhanced liver fibrosis (ELF) test, APRI, and the FIB-4 index compared with liver biopsy in patients with chronic hepatitis C

OBJECTIVES: Although liver biopsy is the gold standard for determining the degree of liver fibrosis, issues regarding its invasiveness and the small amount of liver tissue evaluated can limit its applicability and interpretation in clinical practice. Non-invasive evaluation methods for liver fibrosis can address some of these limitations. The aim of this study was to evaluate the accuracy of transient elastography-FibroScan®, acoustic radiation force impulse (ARFI), enhanced liver fibrosis (ELF), the aspartate aminotransferase-to-platelet ratio index (APRI), and the FIB-4 index compared with liver biopsy in hepatitis C. METHODS: We evaluated chronic hepatitis C patients who were followed at the Division of Clinical Gastroenterology and Hepatology, Hospital das Clínicas, Department of Gastroenterology of University of São Paulo School of Medicine, São Paulo, Brazil, and who underwent liver biopsy. The accuracy of each method was determined by a receiver operating characteristic (ROC) curve analysis, and fibrosis was classified as significant fibrosis (≥F2), advanced fibrosis (≥F3), or cirrhosis (F4). The Obuchowski method was also used to determine the diagnostic accuracy of each method at the various stages of fibrosis. In total, 107 FibroScan®, 51 ARFI, 68 ELF, 106 APRI, and 106 FIB-4 analyses were performed. RESULTS: A total of 107 patients were included in the study. The areas under the ROC curve (AUROCs) according to fibrosis degree were as follows: significant fibrosis (≥F2): FibroScan®: 0.83, FIB-4: 0.76, ELF: 0.70, APRI: 0.69, and ARFI: 0.67; advanced fibrosis (≥F3): FibroScan®: 0.85, ELF: 0.82, FIB-4: 0.77, ARFI: 0.74, and APRI: 0.71; and cirrhosis (F4): APRI: 1, FIB-4: 1, FibroScan®: 0.99, ARFI: 0.96, and ELF: 0.94. The accuracies of transient elastography, ARFI, ELF, APRI and FIB-4 determined by the Obuchowski method were F0-F1: 0.81, 0.78, 0.44, 0.72 and 0.67, respectively; F1-F2: 0.73, 0.53, 0.62, 0.60, and 0.68, respectively; F2-F3: 0.70, 0.64, 0.77, 0.60, and 0.67, respectively; and F3-F4: 0.98, 0.96, 0.82, 1, and 1, respectively. CONCLUSION: Transient elastography remained the most effective method for evaluating all degrees of fibrosis. The accuracy of all methodologies was best at F4.

Vascularização na cirrose hepática: estudo imunoistoquímico baseado em necropsias / Vascularization in hepatic cirrhosis: an immunohistochemical study on necropsies

RACIONAL: O processo patológico mais discutido na gênese da cirrose hepática é a fibrose progressiva, porém alterações na vasculatura do órgão têm sido apontadas como elementos fundamentais na fisiopatologia da doença e de suas complicações, como hipertensão portal, insuficiência hepática e carcinoma hepatocelular. OBJETIVO: Avaliar a densidade microvascular em 35 casos de necropsias de pacientes com cirrose hepática mediante pesquisa imunoistoquímica do marcador endotelial CD34 a fim de comparar os informes obtidos mediante semi-quantificação com aqueles registrados por método quantitativo morfométrico, além de relacionar as alterações vasculares encontradas com os principais agentes causais, padrões de lesão e complicações clínicas da doença. MÉTODOS: Foram estudados 35 casos de cirrose obtidos retrospectivamente de necropsias realizadas no SVOC/USP no período de março de 2002 a junho de 2003. Os casos foram reagrupados segundo padrão anatomopatológico em esteatohepatite e hepatite crônica. A microvasculatura foi avaliada através da reação imunoistoquímica com anticorpo anti-endotelio clone CD34, QBend. RESULTADOS: Observou-se associação significativa entre a abordagem semi-quantitativa e a quantificação morfométrica da densidade de vasos no parênquima, o mesmo não ocorrendo no septo. Não foram detectadas associações específicas entre a neovascularização e os tipos de complicação da hepatopatia aqui estudados. O principal achado foi que a neoformação vascular no parênquima é significantemente maior nas cirroses associadas a hepatites crônicas do que nas esteatohepatites. CONCLUSÃO: Todos esses achados requerem necessários estudos clínicos para avaliar a hipótese de que o estudo do rearranjo da microcirculação hepática, através de marcadores como o CD34, pode ser fator prognóstico em pacientes cirróticos.

BAKGROUND: Fibrosis has been the most cited variable in cirrhosis, but major alterations in hepatic vascularization have been pointed as basic elements in the physiopathology of the illness and its complications as portal hypertension, hepatic failure and hepatocellular carcinoma. METHODS: The present study aims at assessing microvascular density in 35 cases of necropsies of cirrhotic patients by immunohistochemical detection of endothelial marker CD34, comparing semi-quantification with morphometric quantitative method, also searching for a possible relation of vascular alterations with the main causal agents, injury patterns and major clinical complications. RESULTS: A significant association was detected between semi-quantitative and quantitative approach of microvessel density in parenchyma, but not in septa. No significant association was detected between neovascularization and any specific clinical complication of cirrhosis. Under our standpoint, the main achievement of the present study was the demonstration that the vascular neoformation in hepatic parenchyma is significantly higher in cirrhosis associated with chronic hepatitis than in cirrhosis resulting from steatohepatitis. CONCLUSION: These findings require further clinical studies to assess the hypothesis that the rearrangement of liver microcirculation through the detection of CD34 might be relevant in prognostic assessment of cirrhotic patients.

Chronic hepatitis C virus infections in brazilian patients: association with genotypes, clinical parameters and response to long term alpha interferon therapy

No presente estudo, avaliamos a importancia clinico-epidemiologica da genotipagem do VHC em 130 pacientes com diagnostico histologico de hepatite cronica C e sua influencia na resposta terapeutica sustentada. Nao se observou associacao entre os genotipos e os aspectos clinico-epidemiologicos como sexo, idade, vias de trasmissao, presenca ou nao de cirrose e tempo de infeccao. Dos 130 pacientes, 113 foram submetidos a tratamento com...

Hepatite crônica näo-A, näo-B: estudo clínico e morfológico / Chronic hepatitis non-A, non-B: clinical and morphologic study

Tendo em vista a grande freqüência mundial da hepatite crônica näo-A, näo-B (HCNANB) e a escassez de dados nacionais sobre a doença, realizamos estudo retrospectivo de 85 pacientes, atendidos até dezembro de1987. Foram divididos em quatro grupos: I: pós transfusional (PT), 35 pacientes (41,2%); II: de risco (GR), incluindo profissionais da saúde e toxicômanos, 11 (12,9%); III: esporádico com início bem definido (EBD), 19 (22,4%) e IV: esporádico com início näo definido (END), 20 (23,5%). A média de idade no grupo I foi significativamente maior que nos grupos II e III. O padräo polifásico das transaminases foi observado nos quatro grupos. Histologicamente, a freqüência das formas graves foi semelhante nos quatro grupos mas a HC lobular predominou no grupo III. Concluiu-se que a maneira como foi adquirida a infecçäo aguda näo tem implicaçöes prognósticas

Alfa-interferon recombinante no tratamento das hepatites crônicas B e näo-A: resultados preliminares / Recombinant alpha - interferon in the treatment of B and non-A, non-B chronic hepatitis: preliminary results

O interferon-alfa recombinatne (IFN-R) foi administrado a 17 pacientes com hepatite crônica näo-A, näo-B (HCNANB) e com 11 hepatite crônica B (HCB). Apesar da febre sistemática após as primeiras injeçöes (38 a 39 graus Celsius), de outros sintomas como calafrios, dores musculares e cefaléias e das alteraçöes de leucócitos, neutrófilos e por vezes de plaquetas, a tolerância foi considerada satisfatória, sendo os efeitos colaterais reversíveis com o término do tratamento. A eficácia na HCNANB, representada pela normalizaçäo das aminotransferases ou sua reduçäo para níveis inferiores a duas vezes o limite máximo normal, foi observada em quatro de oito pacientes que completaram o tratamento em períodos de três a nove meses. Dos quatro respondedores, um paciente, tratado durante cinco meses, voltou a apresentar elevaçöes das transaminases três meses após o término do tratamento. Por outro lado, em um paciente com HC ativa em fase cirrótica e tratado durante 12 meses observou-se normalizaçäo persistente das aminotransferases, tendo a biópsia de controle revelado acentuada reduçäo do processo inflamatório. A eficácia na HCB, representada pelo desaparecimento do AgHBe e da DNA-polimerase foi observada em três dos sete pacientes que completaram o tratamento. Esses resultados preliminares mostram que o IFN é uma droga promissora, mas sosmente os estudos controlados multicêntricos poderäo estabelecer definitivamente seu valor no tratamento das hepatites crônicas virais